HPLC和LC/MS 緩沖液選擇指南：pH值的實際影響

一般情況下，根據(jù)色譜柱和樣品的特性,，建議采用流動相pH值在2-3的范圍內(nèi)進(jìn)行方法開發(fā),。

在這一pH范圍下,，大多數(shù)有機(jī)酸的電離將被抑制，而且色譜柱上的硅烷醇基團(tuán)的電離也將受到抑制,。

在這些條件下,，堿基會被電離，但是大多數(shù)堿性化合物的pKa>7,，因此如果在pH太高的情況下抑制電離會有害于大多數(shù)的色譜柱,。

所以，在其它條件相同的情況下,，最好是從較低的pH值開始。

如果您需要在高pH值下操作色譜柱,，請確保所選色譜柱在您操作的pH區(qū)域內(nèi)可以保持穩(wěn)定,。

如果低pH電離抑制無法提供可接受的結(jié)果，則可以調(diào)節(jié)流動相pH,，以獲得理想的分離效果,。然而最具成效的是：調(diào)整流動相的有機(jī)物含量（％B溶
劑），從而獲得中性和非離子化合物可接受的保留時間,；然后調(diào)整pH,，進(jìn)而微調(diào)離子分析物的保留時間。