HPLC和LC/MS 緩沖液選擇指南:僅關注高pH值?
如前所述,,如果流動相pH值增加至8以上,硅膠的溶解度也會隨之增加,,所以通常不推薦pH>8,。
然而,,為了獲得所需的分離,可能需要使用更高pH的流動相,。
在這種情況下,,您應該選擇專門用于高pH值的色譜柱。
通常,,高純度硅膠,、高“碳載量”和封端會降低硅膠的溶解度。
由于在高pH值下,,磷酸鹽緩沖液會增加硅膠溶解度,因此應避免使用,。
在這種情況下,,應使用有機緩沖液(如吡咯烷),它可以在高pH值下,,幫助延長色譜柱的使用壽命,。
即便對使用條件進行了篩選,在pH>8的情況下,,色譜柱的使用壽命也會縮短,。
不過,使用聚合物而非硅膠顆粒的色譜柱不易受到硅膠溶解度的影響,,因此其可以在高pH值的情況下使用,;但這類色譜柱無法具有硅基色譜柱那樣較寬范圍的固定相。