氣相色譜分離操作條件的八個選擇
一,、載氣種類及流速的選擇
對于確定的色譜柱和試樣,，有一個最佳的載氣流速，此時柱效最高,，根據(jù)公式：H ＝ A＋B/U＋C
用在不同流速下測得的塔板高度H對流速u作圖,，得H-u曲線圖,。在曲線的最低點，塔板高度H最?。℉最?。４藭r柱效最高,。
對于填充柱,，N2的最佳實用線速為10～12cm?s-1；H2為15～20cm?s-1,。通常載氣的流速習(xí)慣上用柱前的體積流速（mL?s-1）來表示,，用轉(zhuǎn)子流量計測量,；也可通過皂膜流量計在柱后進(jìn)行測定,。若色譜柱內(nèi)徑為3mm,N2的流速一般為40～60L?min-1，H2的流速為60-90mL?min-1,。
二,、色譜柱柱溫的選擇
柱溫是一個重要的操作參數(shù)，直接影響分離效能和分析速度。首先要考慮到每種固定液都有一定的使用溫度,。柱溫不能高于固定液的最高使用溫度,，否則固定液揮發(fā)流失。
柱溫對組分分離的影響較大,，（1）提高柱溫使各組分的揮發(fā)靠攏,，不利于分離， 所以,，從分離的角度考慮,，宜采用較低的柱溫。（2）柱溫太低,，被測組分在兩相中的擴(kuò)散速率大為減少,，分配不能迅速達(dá)到平衡，峰形變寬,，柱效也會下降,，并會延長分析時間。
柱溫的選擇原則是：應(yīng)使難分離的兩組分達(dá)到預(yù)期的分離效果,，峰形正常的前提下,，盡可能采用較高的柱溫。一般柱溫應(yīng)比試樣中各組分的平均沸點低20～30℃,，具體的選擇可通過試驗決定,。
對于寬沸點樣品可采用程序升溫的方法來分析。三,、氣化溫度 進(jìn)樣后要有足夠的氣化溫度,，使液體試樣迅速氣化被載氣帶入柱中。在保證試樣不分解的情況下,，適當(dāng)提高氣化溫度對分離及定量有利,，尤其當(dāng)進(jìn)樣量大時更是如此。
一般選擇：氣化溫度 > 檢測器溫度 ≥ 柱溫,。
四,、色譜柱固定液的性質(zhì)和用量
固定液的性質(zhì)對分離是起決定作用的。有關(guān)這問題已詳細(xì)討論過,。在這里討論一下固定液的用量問題,。一般來說，擔(dān)體的表面積越大,，固定液用量可以越高,，允許的進(jìn)樣量也就越多。為了改善液相傳質(zhì),，應(yīng)使液膜薄一些,。目前填充色譜柱中盛行低固定液含量的色譜柱。固定液液膜薄，柱效能提高,，并可縮短分析時間,。但固定液用量太低，液膜太薄,，允許的進(jìn)樣量也就越少,。因此固定液的用量要根據(jù)具體情況決定。
固定液的配比（指固定液與擔(dān)體的質(zhì)量比）一般用5 ：100到25 ：100,，也有低于5 ：100的,。不同的擔(dān)體為要達(dá)到較高的柱效能，其固定液的配比往往是不同的,。
一般來說,，擔(dān)體的表面積越大，固定液的含量可以越高,。制備色譜往往用高配比的固定液,。
五、色譜柱擔(dān)體的性質(zhì)和粒度
擔(dān)體的表面結(jié)構(gòu)和孔徑分布決定了固定液在擔(dān)體上的分布以及液相傳質(zhì)和縱向擴(kuò)散的情況,。要求擔(dān)體表面積大,，表面和孔徑分布均勻。這樣,，固定液涂在擔(dān)體表面上成為均勻的薄膜,，液相傳質(zhì)就快，就可提高柱效,。對擔(dān)體粒度要求均勻,、細(xì)小，這樣有利于提高柱效,。但粒度過細(xì),，阻力過大，使柱壓降增大,，對操作不利,。對3～6mm內(nèi)徑的色譜柱，使用60～80目的擔(dān)體較為合適,。
六,、進(jìn)樣時間和進(jìn)樣量
進(jìn)樣速度必須很快，一般用注射器或進(jìn)樣閥進(jìn)樣時,，進(jìn)樣時間都在一秒鐘以內(nèi),。若進(jìn)樣時間過長，試樣原始寬度變大,，半峰寬必將變寬,，甚至使峰變形。
進(jìn)樣量一般是比較少的,。液體試樣一般進(jìn)樣0.1～5μL,。氣體試樣0.1～10mL。進(jìn)樣量太多,，會使幾個峰疊在一起,，分離不好。但進(jìn)樣量太少,，又會使含量少的組分因檢測器靈敏度不夠而不出峰,。最大允許的進(jìn)樣量，應(yīng)控制在峰面積或峰高與進(jìn)樣量呈線性關(guān)系的范圍以內(nèi),。
七,、色譜柱柱長和柱內(nèi)徑
分離度R正比于柱長L的平方根，增加柱長對分離有利,。但柱長增加,，各組分的保留時間增加，分析時間延長,；柱長增加,，柱阻力增加，操作不便,。
只要能滿足一定分離度（R≥1.5）的條件下,，盡可能使用較短的柱子。一般常用的填充柱長為1～3米,。
色譜柱內(nèi)徑增加,，可以增加分離的樣品量，但縱向擴(kuò)散的路徑增加,，柱效降低,，不利于分離。一般常用的填充柱內(nèi)徑為3～4mm
