填料做為色譜技術(shù)的核心,一直是色譜研究中最豐富,、最有活力,、最富于創(chuàng)造性的研究方向之一,。經(jīng)常使用色譜柱的您知道硅膠鍵是如何相互作用的嗎?
要搞明白這個問題,,我們要先明白色譜柱的結(jié)構(gòu),。
色譜柱由接頭、螺帽,、柱管,、填料、墊圈及過濾片等組成,,其中填料為色譜柱的核心部分,,科研工作者在填料上發(fā)揮奇思妙想,開發(fā)出市面上種類繁多的色譜柱,,每種色譜柱又有其獨特的選擇性及應(yīng)用,。
常用的色譜柱填料基質(zhì)為硅膠,硅膠作為基質(zhì)有如下優(yōu)點:
根據(jù) R3 基團的不同,,可將色譜柱分為不同的類型,。
1、空間位阻
普通的色譜柱在 pH <2 時不穩(wěn)定,,發(fā)生水解,,導(dǎo)致鍵合相流失。當我們用異丙基,、二異丁基來取代甲基的話,,就在鍵合相上形成一個保護層,這樣不僅能抗水解能力(pH1-8),,還能防止分離化合物與硅羥基之間的作用,,改善峰型。
2,、極性嵌入
另外,極性嵌入可降低「脫水」( 疏水塌陷)危險,,即使在含水量高的流動相條件下,,樣品也同樣有穩(wěn)定保留和最佳峰形。
疏水塌陷:普通的 HPLC 色譜柱在有機溶劑含量低甚至 100% 水流動相條件下,,一旦流速停止,,推動水溶液流動相進入硅膠孔隙的壓力減小,,當壓力降低時,疏水的微孔表面排斥極性流動相,,便會發(fā)生鍵合相孔隙脫水,,從而導(dǎo)致所謂的「疏水塌陷」,對化合物的保留能力大大減弱,。
3,、雙層表面修飾
核殼型色譜柱對儀器的柱外死體積要求高,、且柱容量小于全多孔色譜填料,因而并不適用于大規(guī)模的制備液相分離需求,。