液相色譜在使用過程中主要有四大關(guān)鍵因素:
1.液相色譜儀本身:
對于儀器本身一般不會有問題,,特別是剛買回來的新儀器,。
對于儀器本身最重要的就是儀器的校驗(yàn),剛買回來的儀器一般都是由賣家先對儀器做系統(tǒng)的確認(rèn)工作(包括IQ,、PQ,、OQ),,確認(rèn)順利通過后,再請國家或省級儀器檢定局的來校驗(yàn),,檢定合格后就可以放心使用了,,除此之外,一些做得好的公司每半年會對儀器進(jìn)行一次的內(nèi)部校驗(yàn),,目的就是為了保證儀器的正??蛇\(yùn)行狀態(tài)。
2.色譜條件:
色譜條件一般包括流動相,、色譜柱,、檢測波長、流速及進(jìn)樣量,。流動相就涉及到配制流動相所用到的水和試劑試液,,水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大于18.2兆歐級別,試劑試液要求用色譜級別的,,原因?yàn)榉乐顾驮噭┰囈褐械碾s質(zhì)對色譜結(jié)果的干擾,。
色譜柱會因不同的品種而有不同的要求,,但每根色譜柱都有它的清洗要求,這個在色譜柱說明書上都可以找到,,一定要根據(jù)上面的要求進(jìn)行,,否則會造成色譜柱效下降和色譜柱的使用壽命縮短,檢測波長也會因品種的不同有不同的要求,,這里需要指出的是要注意觀察檢測器氘燈能量的變化,,比如基線波動大,活性成分的響應(yīng)值突然變小等,,都有可能是氘燈的能量不足所引起的,,氘燈一般建議使用800小時(shí),但實(shí)際上使用時(shí)間不止,,可根據(jù)實(shí)際情況更換,。流速也因品種的不同而不同,一般為1.0ml/min,,流速是不可隨意改動的,,特別是作為QC人員,但是作為研發(fā)人員,,有時(shí)為了摸索條件或進(jìn)行方法耐用性驗(yàn)證,,會對流速進(jìn)行改變以評價(jià)方法的適用性。對于進(jìn)樣量因不同的品種也有不同規(guī)定,,進(jìn)樣量這塊現(xiàn)在都使用自動進(jìn)樣,,所以進(jìn)樣精密度都很好,,不需強(qiáng)調(diào)什么,。
3.操作人員:
首先,作為液相操作人員,,一定要認(rèn)真學(xué)習(xí)夜想的說明書,,掌握液相硬件和軟件的操作,掌握日常的維護(hù)保養(yǎng),,掌握zui基礎(chǔ)故障的排除和維修,。一般液相的操作規(guī)程也是有操作人員起草的,所以只要嚴(yán)格按照操作要求進(jìn)行操作,,一般不會出現(xiàn)問題,,當(dāng)然啫喱需要特別指出的是對于液相的日常維護(hù)保養(yǎng)很重要,比如流動相的過濾,、脫氣,、泵密封墊的清洗、系統(tǒng)管路的清洗,、溶劑過濾頭的清洗等,,倘若不堅(jiān)持,,很容易導(dǎo)致色譜柱堵塞、系統(tǒng)壓力過高,、色譜峰異常等不必要的故障,,浪費(fèi)時(shí)間。其次,,操作人員在配制液相分析用樣品溶液時(shí),,由同一個人單獨(dú)完成,以免不必要的偶然誤差,。
4.液相安裝環(huán)境:
液相色譜儀應(yīng)盡量安裝于水平,、遠(yuǎn)離振動、電磁干擾的屋內(nèi)的臺面上,,有條件的話盡量將液相數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)分隔開,,一個是防止色譜基線噪音偏大,基線不穩(wěn)等,,一個是為減少對人體的危害,。