ACE 和菲羅門 C4反相色譜柱是一款適合于蛋白質(zhì)分離分析用的反相色譜柱,。
使用3微米粒徑的硅膠填料,，優(yōu)化了孔徑，固定相配體的烷基鏈長(zhǎng)及表面鍵合密度,，可實(shí)現(xiàn)高分辨率和高回收率的分析,。
使用短柱可以在高流速下實(shí)現(xiàn)快速分析。
ACE 和菲羅門 C4反相色譜柱的優(yōu)點(diǎn)介紹：
1,、定量結(jié)果更準(zhǔn)確,，包括純度分析和穩(wěn)定性分析
2,、靈敏度更高，檢測(cè)下限更低,，對(duì)低濃度雜質(zhì)有更強(qiáng)的檢測(cè)能力
3,、分離度更好，更有利于相鄰色譜峰的分離
4,、色譜柱間重現(xiàn)性： 指同一批次合成的填料之間的重現(xiàn)性
5,、色譜柱批次間重現(xiàn)性： 指不同批次合成的填料之間的重現(xiàn)性。
C4反相色譜柱在使用前,，醉好進(jìn)行柱的性能測(cè)試,，并將結(jié)果保存起來(lái)，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考,。
在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照C4反相色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行（出廠測(cè)試所使用的條件是醉佳條件）,，只有這樣，測(cè)得的結(jié)果才有可比性,。
但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品,、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同,。
1,、樣品的前處理
a、醉好使用流動(dòng)相溶解樣品,。
b、使用預(yù)處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì),。
c,、使用0.45μm的過(guò)濾膜過(guò)濾除去微粒雜質(zhì)。
2,、流動(dòng)相的配制
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,，因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn)：
a、流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力,，保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中（或長(zhǎng)時(shí)間保留在柱中）,。
b、流動(dòng)相與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)c,、流動(dòng)相的黏度要盡量小,，以便得到好的分離效果;降低柱壓降，延長(zhǎng)泵的使用壽命（可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度）,。
d,、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測(cè)器相適應(yīng)。如使用UV檢測(cè)器,，醉好使用對(duì)紫外吸收較低的溶劑配制,。
e,、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡,，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行,。
f、在流動(dòng)相配制好后,，一定要進(jìn)行脫氣,。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測(cè)，還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用,。
3,、流動(dòng)相流速的選擇
因柱效是柱中流動(dòng)相線性流速的函數(shù)，使用不同的流速可得到不同的柱效,。對(duì)于一根特定的C4反相色譜柱,，要追求醉佳柱效，醉好使用醉佳流速,。對(duì)內(nèi)徑為4.6mm的C4反相色譜柱,，流速一般選擇1ml/min，對(duì)于內(nèi)徑為4.0mm柱,，流速0.8ml/min為佳,。
當(dāng)選用醉佳流速時(shí)，分析時(shí)間可能延長(zhǎng),?？刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間（如使用反相柱時(shí)，可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量）,。
