ACE 和菲羅門 C4反相色譜柱是一款適合于蛋白質(zhì)分離分析用的反相色譜柱,。
使用3微米粒徑的硅膠填料,，優(yōu)化了孔徑，固定相配體的烷基鏈長及表面鍵合密度,，可實現(xiàn)高分辨率和高回收率的分析,。
使用短柱可以在高流速下實現(xiàn)快速分析。
ACE 和菲羅門 C4反相色譜柱的優(yōu)點介紹：
1,、定量結果更準確,，包括純度分析和穩(wěn)定性分析
2、靈敏度更高,，檢測下限更低,，對低濃度雜質(zhì)有更強的檢測能力
3、分離度更好,，更有利于相鄰色譜峰的分離
4、色譜柱間重現(xiàn)性： 指同一批次合成的填料之間的重現(xiàn)性
5,、色譜柱批次間重現(xiàn)性： 指不同批次合成的填料之間的重現(xiàn)性,。
C4反相色譜柱在使用前，醉好進行柱的性能測試,，并將結果保存起來,，作為今后評價柱性能變化的參考。
在做柱性能測試時要按照C4反相色譜柱出廠報告中的條件進行（出廠測試所使用的條件是醉佳條件）,，只有這樣,，測得的結果才有可比性。
但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品,、流動相,、柱溫等條件的差異而有所不同。
1,、樣品的前處理
a,、醉好使用流動相溶解樣品。
b,、使用預處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì),。
c、使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì),。
2,、流動相的配制
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的,，因此要求流動相具備以下的特點：
a、流動相對樣品具有一定的溶解能力,，保證樣品組分不會沉淀在柱中（或長時間保留在柱中）,。
b、流動相與樣品不產(chǎn)生化學反應c,、流動相的黏度要盡量小,，以便得到好的分離效果;降低柱壓降，延長泵的使用壽命（可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度）,。
d,、流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,，醉好使用對紫外吸收較低的溶劑配制,。
e、流動相沸點不要太低,，否則容易產(chǎn)生氣泡,，導致實驗無法進行。
f,、在流動相配制好后,，一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用,。
3、流動相流速的選擇
因柱效是柱中流動相線性流速的函數(shù),，使用不同的流速可得到不同的柱效,。對于一根特定的C4反相色譜柱，要追求醉佳柱效,，醉好使用醉佳流速,。對內(nèi)徑為4.6mm的C4反相色譜柱，流速一般選擇1ml/min,，對于內(nèi)徑為4.0mm柱,，流速0.8ml/min為佳。
當選用醉佳流速時,，分析時間可能延長,。可采用改變流動相的洗滌強度的方法以縮短分析時間（如使用反相柱時,，可適當增加甲醇或乙腈的含量）,。
