高效液相柱的四個使用注意事項
高效色譜柱是一種具有極高碳載量的固定相,。高碳鏈覆蓋度使其具有密集的鍵和優(yōu)異的形狀選擇性,,在PH低至1的環(huán)境中仍能保持良好的穩(wěn)定性。它主要應(yīng)用于傳統(tǒng)的C18柱無法分離的類胡蘿卜素的異構(gòu)體和其他長烴基物質(zhì)的分離,。
高效液相柱的使用的四個注意事項:
在使用前,,進行柱的性能測試,,并將結(jié)果保存起來,,作為今后評價柱性能變化的參考,。在做柱性能測試時要按照出廠報告中的條件進行,只有這樣,,測得的結(jié)果才有可比性,。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相,、柱溫等條件的差異而有所不同,。
1,、在條件允許情況下,,在使用前對新色譜柱按照說明書方法進行柱效測試,。以確保色譜柱的正常。
2,、所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃,。
3、樣品
將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中,。如果使用梯度洗脫,,則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物,,使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾,。樣品溶液如果使用強溶劑(例如,流動相為水,,樣品溶劑為甲醇),,為達到較好峰形,需要降低進樣量(以250x4.6mm規(guī)格為例,,小于10μL),。
4、流動相
所有流動相,,特別是含有緩沖鹽的流動相,,當(dāng)日實驗當(dāng)日配制;如果使用了前日配制的流動相,,請確保流動相pH值沒有變化,,并確保流動相沒有長菌。流動相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型,。