液相柱進行樣品分析的10個步驟

1.確保流動相潔凈,，每隔24-48小時就應新配水相流動相,，并同時更換或仔細清洗流動相溶劑瓶,，以避免流動相長菌。確保實驗室純水系統(tǒng)工作正常,。

2.確保樣品不含顆粒型雜質(zhì)。如樣品過臟,，或有微粒存在,，需要考慮適合的樣品制備方法。在使用樣品過濾器時,，確保濾膜為0.22 μm,，且與樣品溶劑完全兼容（不發(fā)生溶解）。也可考慮使用高速離心法去除顆粒性雜質(zhì),，例如8000 rpm轉(zhuǎn)速以上離心20分鐘后,，移取樣品上清液進樣。

3.確保樣品溶液與流動相條件兼容,，進樣后不會發(fā)生沉淀,、或溶劑不互溶情況。通常使用流動相或比流動相洗脫強度弱的溶液（即有機溶劑比例較低）溶解或稀釋樣品,，這樣可以獲得優(yōu)異的峰形和檢測靈敏度,。

4.如系統(tǒng)在線混合生成流動相，預先檢查流動相各組分的兼容性,。例如,，當磷酸鹽緩沖液與高濃度乙腈（例如≥70%）混用時,，可能發(fā)生鹽析出。

5.了解色譜柱的操作使用限度,。如果所使用的流動相條件,、柱溫、以及樣品溶液條件,，不利于色譜柱壽命時,，請使用保護柱以延長柱壽命。

6.在使用流動相進行柱平衡之前,，如果流動相中含有可能析出的緩沖鹽,，先使用5倍柱體積的有機溶劑-水溶液進行過渡。例如,，在使用40/60 甲醇/磷酸鹽緩沖液流動相之前,，先使用5倍柱體積的40/60 甲醇/純水溶液沖洗色譜柱。

7.在常規(guī)分析過程中,，每針或間隔若干針清洗柱內(nèi)可能積累的污染物,。完成分析后，徹底清洗色譜柱,，除去柱內(nèi)緩沖鹽和污染物,。

8.在色譜柱使用過程中，定期進行柱效測試,，記錄塔板數(shù)與壓力,，從而追蹤監(jiān)控色譜柱的性能變化。柱效測試方法應固定,。

9.反相色譜柱應保存于合適的高比例或100%有機相（如乙腈或甲醇）中,。如色譜柱使用于高溫或極端PH條件，或停用色譜柱超過72小時,，用100%乙腈保存色譜柱,。

10.使用原配的柱堵頭，確保堵頭擰緊以避免柱內(nèi)溶劑揮發(fā),。取放色譜柱時避免磕碰掉落,。