色譜柱清洗的基本原則和一些特殊色譜柱的使用注意事項

基本原則

及時使用強流動相清洗色譜柱，特別是使用等度分析方法或者洗脫強度比較低的分析方法時,，很容易積累強保留的化合物,。

a.對于反相模式（如使用C18柱）：

1).用高比例水相（如80%）沖洗色譜柱5-10個柱體積，以去除管路和色譜柱中的緩沖鹽（如果體系沒有使用緩沖鹽可以省略這一步）,；

2).用高比例有機相（如80-90甲醇/乙腈等）沖洗色譜柱10-20個柱體積,，必要的時候，可以使用更強的溶劑（如異丙醇或者含少量THF的異丙醇）清洗,，再用推薦保存的流動相沖洗后保存,。

b. 對于HILIC模式（如使用Diol柱）：

1).用高比例水相（如50%的水，部分HILIC柱有水相比例的最高限度,，需要仔細閱讀官方說明書）沖洗色譜柱10-20個柱體積,，以去除管路和色譜柱中的緩沖鹽，并清洗色譜柱,；

2) .按照推薦保存的流動相沖洗后保存,。

Comix系列混合模式色譜柱：

對于含有強堿性基團的固定相，如：

必須需要在弱酸性條件下使用和保存,，因為強堿性基團會在硅膠表面形成強堿性環(huán)境而破壞硅膠基質,。

對于含有酸性基團的固定相，如：

不可使用甲醇作為有機相,，因為酸性基團與甲醇發(fā)生酯化反應而被改性（稀釋劑中的少量甲醇影響可以忽略）,，特別要注意避免管路殘留的甲醇被沖洗進色譜柱。

氨基柱：

1. 水相高的時候易發(fā)生固定相（氨丙基）水解而發(fā)生柱流失,；

2. 氨基身會電離而產生強堿性環(huán)境而腐蝕硅膠,，因此在弱酸性條件下穩(wěn)定性更好；

3. 易與醛類化合物（如還原性糖：葡萄糖等） ,、芳香羰基化合物發(fā)生席夫堿反應,，而死吸附化合物并改性色譜柱，影響重現(xiàn)性：

4. 盡量保存在純有機相中,，以避免發(fā)生水解反應和自身電離產生強堿性條件而腐蝕硅膠,。