高效液相色譜儀在使用中可能會遇到壓力過高的問題,。壓力突然升高,，一般都是由于流路中有堵塞的原因,。以下是排查和解決這類問題的步驟：

1. 斷開真空泵的入口處,，此時PEEK管里充滿液體，使PEEK管低于溶劑瓶,，看液體是否自由滴下,。如果液體不滴或緩慢滴下,，則是溶劑過濾頭堵塞。如果液體自由滴下,，溶劑過濾頭正常，再檢查,。
2. 打開Purge閥,，使流動相不經(jīng)過柱子，如果壓力沒有明顯下降,，則是過濾白頭堵塞,。處理方法是將過濾白頭取出，用10%的異丙醇超聲半個小時,。如果壓力降至100 PSI（6.7 Bar）以下,，過濾白頭正常，再檢查,。
3. 把色譜柱出口端取下,，如果壓力不下降，則是柱子堵塞,。處理方法是如果是緩沖鹽堵塞,，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞,，則要用比現(xiàn)在流動相更強的流動相沖至壓力正常,。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀器上,，用流動相沖洗柱子,。

此外，影響系統(tǒng)壓力的因素還有流動相的溶劑組成,、溫度及流速,。具體來說：

1. 流動相的粘度是產(chǎn)生反壓的主要原因。有機溶劑-水的粘度隨組成與壓力的關(guān)系圖顯示,，乙腈-水比例為（20:80）,、甲醇-水比例為（40:60至50:50）時，系統(tǒng)的壓力最大,。在做實驗時應(yīng)盡量避開這個比例范圍,。另外，異丙醇粘度大,，一般不作流動相使用,。
2. 流速對反壓的影響是線性關(guān)系，流速增加,，反壓亦增大,。
3. 溫度對反壓的影響是反比關(guān)系,，溫度升高，反壓降低,，對某些流動相的影響更大一些,。
4. 液相色譜儀各模塊之間的連接管路也會產(chǎn)生壓力，系統(tǒng)壓力與管路的長度成正比,，與管路直徑的四次方成反比（1/4d）,。上述考慮的是柱外因素對系統(tǒng)壓力的影響，色譜柱對系統(tǒng)壓力的影響也很大,，反壓與色譜柱長度成正比,，與填料顆粒度的平方成反比（2.5μm填料比3.5μm填料反壓高）。

以上信息僅供參考,，如遇到無法解決的問題建議聯(lián)系專業(yè)技術(shù)人員尋求幫助或咨詢液相色譜儀品牌廠商尋求解決方案,。