HPLC(高效液相色譜)和UHPLC(超高效液相色譜)系統(tǒng)及其模塊組成在結(jié)構(gòu)和功能上具有一定的相似性和差異性,。以下是關(guān)于HPLC和UHPLC系統(tǒng)及模塊組成的詳細(xì)闡述:
### 一,、HPLC系統(tǒng)組成
HPLC系統(tǒng)一般由以下幾個(gè)關(guān)鍵模塊組成:
1. **輸液系統(tǒng)**:
* **輸液泵**:是HPLC系統(tǒng)中最重要的部件之一,負(fù)責(zé)將流動(dòng)相以恒定流量和壓力輸送到色譜柱中,。輸液泵按照輸出液恒定的因素分為恒壓泵和恒流泵,,按工作方式分為氣動(dòng)泵和機(jī)械泵兩大類,。機(jī)械泵中又有螺旋傳動(dòng)注射泵、單活塞往復(fù)泵,、雙活塞往復(fù)泵和往復(fù)式隔膜泵等多種類型,。
* **溶劑容器**:用于儲(chǔ)存流動(dòng)相,通常包括多個(gè)溶劑瓶,,以便進(jìn)行梯度洗脫,。
2. **進(jìn)樣系統(tǒng)**:
* **進(jìn)樣器**:負(fù)責(zé)將樣品引入色譜柱中。常見的進(jìn)樣器有隔膜和停流進(jìn)樣器,、六通進(jìn)樣閥和自動(dòng)進(jìn)樣器等,。進(jìn)樣裝置要求密封性好、死體積小,、重復(fù)性好,,保證中心進(jìn)樣,進(jìn)樣時(shí)對(duì)色譜系統(tǒng)的壓力,、流量影響小,。
3. **分離系統(tǒng)**:
* **色譜柱**:是HPLC系統(tǒng)的核心部件,負(fù)責(zé)將樣品中的各組分進(jìn)行分離,。色譜柱由柱管,、壓帽、卡套(密封環(huán)),、篩板(濾片),、接頭、螺絲等組成,,內(nèi)部填充有經(jīng)過制備處理的色譜填料,,通常是5\~10粒徑的球形顆粒。
* **保護(hù)柱**:用于保護(hù)色譜柱免受污染和堵塞,,延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命,。
* **柱溫箱**:用于控制色譜柱的溫度,以保持分離條件的穩(wěn)定性,。
4. **檢測(cè)系統(tǒng)**:
* **檢測(cè)器**:用于檢測(cè)從色譜柱中流出的樣品組分,,并將其轉(zhuǎn)換為電信號(hào)進(jìn)行記錄和分析。常見的檢測(cè)器有紫外-可見光檢測(cè)器(UV/VIS),、熒光檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器等。
5. **數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)**:
* **數(shù)據(jù)記錄及處理裝置**:用于記錄檢測(cè)器輸出的電信號(hào),,并將其轉(zhuǎn)換為色譜圖或數(shù)據(jù)報(bào)告,,以便進(jìn)行后續(xù)的數(shù)據(jù)分析和處理。
此外,,HPLC系統(tǒng)還可根據(jù)需要配置梯度洗脫裝置,、在線脫氣機(jī)、預(yù)柱等附加模塊,。
### 二,、UHPLC系統(tǒng)組成
UHPLC系統(tǒng)是在HPLC系統(tǒng)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,具有更高的分離效率和更快的分析速度,。其系統(tǒng)組成與HPLC系統(tǒng)類似,,但存在一些關(guān)鍵差異:
1. **超高壓輸液系統(tǒng)**:
* UHPLC系統(tǒng)采用超高壓輸液泵,最高壓力可達(dá)150MPa以上,,以應(yīng)對(duì)更小的顆粒尺寸和更高的流速需求,。
2. **窄直徑色譜柱**:
* UHPLC系統(tǒng)通常使用直徑更小的色譜柱(如1.8mm、2.1mm等),,以提高分離效率和縮短分析時(shí)間,。
3. **高效檢測(cè)器**:
* 為了匹配更高的分離效率,UHPLC系統(tǒng)通常配備更靈敏,、更高效的檢測(cè)器,,如二極管陣列檢測(cè)器(DAD)、質(zhì)譜檢測(cè)器(MS)等,。
4. **自動(dòng)化控制系統(tǒng)**:
* UHPLC系統(tǒng)通常配備更先進(jìn)的自動(dòng)化控制系統(tǒng),,以實(shí)現(xiàn)更精確的控制和更高的分析通量。
綜上所述,,HPLC和UHPLC系統(tǒng)在組成上具有一定的相似性,,但UHPLC系統(tǒng)在輸液系統(tǒng)、色譜柱,、檢測(cè)器和自動(dòng)化控制系統(tǒng)等方面進(jìn)行了優(yōu)化和升級(jí),,以應(yīng)對(duì)更高的分離效率和更快的分析速度需求。