在色譜分析中,特別是液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)分析中,,循環(huán)時間,、駐留時間和通道延遲時間(也稱通道間延遲時間,Interchannel Delay,,ICD)的設(shè)置對于實驗結(jié)果的準確性和靈敏度至關(guān)重要,。以下是對這三個參數(shù)的正確設(shè)置的詳細解釋:
### 一、循環(huán)時間(Cycle Time)
循環(huán)時間是指一個采樣循環(huán)(即一個Cycle)對所有MRM(多重反應監(jiān)測)離子通道掃描一次所消耗的時間,。它決定了儀器在給定時間內(nèi)能夠掃描多少次,,從而影響到數(shù)據(jù)的采集速度和分辨率。
1. **計算方法**:
循環(huán)時間 = 通道數(shù)量 × 駐留時間 + (通道數(shù)量 - 1) × 通道延遲時間 + 2 × 極性切換時間(如果存在極性切換)
其中,,極性切換時間是指切換不同極性模式(如正離子模式和負離子模式)所用的時間,,它也與儀器硬件本身有關(guān)。
2. **設(shè)置建議**:
* 在保證靈敏度和分辨率的前提下,,盡量縮短循環(huán)時間,,以提高數(shù)據(jù)采集速度。
* 根據(jù)實驗需求選擇合適的通道數(shù)量和駐留時間,,以平衡數(shù)據(jù)采集速度和分辨率,。
### 二、駐留時間(Dwell Time)
駐留時間表示儀器采集某離子的時間,,是MRM方法中的一個重要參數(shù),。它直接影響到數(shù)據(jù)結(jié)果的質(zhì)量和靈敏度。
1. **設(shè)置建議**:
* 駐留時間越短,,色譜峰點數(shù)越多,,但過短的駐留時間會導致噪聲增加,信噪比下降,,甚至可能導致色譜峰峰形毛刺,。
* 駐留時間越長,色譜峰點數(shù)越少,,點數(shù)過少則導致色譜峰成鋸齒形,,影響定量的準確性和精度。
* 通常色譜峰要求至少10個點數(shù),,定量要求嚴格一點會建議在15\~20個點數(shù),。
* 需要在信噪比和色譜峰點數(shù)上進行權(quán)衡,根據(jù)實驗需求和儀器性能選擇合適的駐留時間,。
### 三,、通道延遲時間(Interchannel Delay,ICD)
通道延遲時間指的是掃描不同MRM通道需要切換電壓消耗的時間,。它通常與儀器硬件本身有關(guān),,并且會影響到循環(huán)時間的計算,。
1. **設(shè)置建議**:
* 通道延遲時間是儀器固有的屬性,通常無法直接調(diào)整,。但可以在選擇儀器時考慮其通道延遲時間的大小,,以選擇性能更優(yōu)的儀器。
* 在實驗設(shè)置中,,可以通過優(yōu)化其他參數(shù)(如駐留時間和循環(huán)時間)來彌補通道延遲時間對實驗結(jié)果的影響,。
綜上所述,循環(huán)時間,、駐留時間和通道延遲時間的正確設(shè)置需要綜合考慮實驗需求,、儀器性能和實驗條件。通過合理的參數(shù)設(shè)置,,可以確保實驗結(jié)果的準確性和靈敏度,。