內(nèi)標(biāo)法(Internal Standard Method)是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加到一定量的被分析樣品混合物中,然后對含有內(nèi)標(biāo)物的樣品進(jìn)行色譜分析,,分別測定內(nèi)標(biāo)物和待測組分的峰面積(或峰高)及相對校正因子,,按公式即可求出被測組分在樣品中的百分含量。內(nèi)標(biāo)法是色譜分析中一種比較準(zhǔn)確的定量方法,。以下對內(nèi)標(biāo)的選擇和使用注意事項進(jìn)行介紹:
### 內(nèi)標(biāo)物的選擇
內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)滿足以下條件:
1. **純凈的已知化合物**:內(nèi)標(biāo)物必須是純凈的,,具有明確的分子式、分子量和純度標(biāo)準(zhǔn),,以便于準(zhǔn)確稱量和配制,。
2. **性質(zhì)相似但不反應(yīng)**:內(nèi)標(biāo)物應(yīng)與被測組分性質(zhì)相似(如沸點(diǎn)、極性,、化學(xué)結(jié)構(gòu)等),,但不與被測組分及樣品中其他組分發(fā)生反應(yīng),以避免干擾,。
3. **含量相近**:加入量應(yīng)與被測組分含量相近,,以便在色譜圖上獲得相近的峰高或峰面積,從而減小測量誤差,。
4. **校正因子相近**:內(nèi)標(biāo)物還應(yīng)具有與被測組分相近的校正因子,,以確保校正的準(zhǔn)確性。
5. **濃度穩(wěn)定**:內(nèi)標(biāo)物的濃度應(yīng)穩(wěn)定,,以確保分析過程中的穩(wěn)定性,。
6. **原本不存在或含量極低**:樣品中原本不含該組分或含量極低,以避免干擾測定結(jié)果,。
7. **保留時間有差異**:內(nèi)標(biāo)物的色譜峰應(yīng)與被測組分的色譜峰能完全分離,,且保留時間有明顯差異,以避免色譜峰共溢出,。
8. **化學(xué)穩(wěn)定**:在給定色譜條件下,,內(nèi)標(biāo)物應(yīng)具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,不易發(fā)生分解,、氧化等反應(yīng),。
### 使用注意事項
1. **準(zhǔn)確稱量**:應(yīng)準(zhǔn)確稱量內(nèi)標(biāo)物并配制成合適的濃度。
2. **混合均勻**:在加入內(nèi)標(biāo)物前,應(yīng)確保樣品已充分混合均勻,,以提高測定的準(zhǔn)確性,。
3. **避免干擾**:應(yīng)確保內(nèi)標(biāo)物不與樣品中的其他組分發(fā)生反應(yīng)或干擾待測物的測定。
4. **制作標(biāo)準(zhǔn)曲線**:在進(jìn)行定量分析前,,應(yīng)先配制一定重量比的被測組分和內(nèi)標(biāo)樣品的混合物做色譜分析,,測量峰面積,制作重量比和面積比的關(guān)系曲線,,即標(biāo)準(zhǔn)曲線,。實(shí)際樣品分析時所采用的色譜條件應(yīng)保持與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時所用的條件一致,。
5. **單點(diǎn)校正**:在使用過程中應(yīng)定期進(jìn)行單點(diǎn)校正,,若所得值與平均值的偏差過大,則應(yīng)重新制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
6. **優(yōu)化濃度**:內(nèi)標(biāo)物的濃度選擇應(yīng)根據(jù)具體的分析對象和實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化,。例如,對于某些高濃度樣品,,可能需要選擇較低濃度的內(nèi)標(biāo)物以避免色譜峰飽和,;而對于某些低濃度樣品,則可能需要選擇較高濃度的內(nèi)標(biāo)物以提高測量的靈敏度,。
綜上所述,,選擇合適的內(nèi)標(biāo)物并遵循正確的使用注意事項,可以大大提高內(nèi)標(biāo)法定量分析的準(zhǔn)確性和可靠性,。