標(biāo)準(zhǔn)曲線在分析檢測中扮演著至關(guān)重要的角色,以下是關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)曲線的基礎(chǔ)理論知識:
一,、標(biāo)準(zhǔn)曲線的定義 分析檢測中的標(biāo)準(zhǔn)曲線是指一系列已知含量(濃度/量)的物質(zhì)與儀器響應(yīng)/信號之間的關(guān)系,。數(shù)學(xué)上,這種關(guān)系可以通過曲線方程來表示,;圖形上,,則呈現(xiàn)為標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線的目的是可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出待測物質(zhì)的含量,。
二,、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作要求 按GB/T 22554-2010《基于標(biāo)準(zhǔn)樣品的線性校準(zhǔn)》推薦,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時,,應(yīng)遵循以下要求:
濃度范圍:標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度范圍應(yīng)覆蓋正常操作條件下的被測量范圍,。 組分一致性:標(biāo)準(zhǔn)樣品的組分應(yīng)盡量與被測樣品組分一致,,以減少基體干擾。 濃度分布:標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度值應(yīng)等距離的分布在被測量范圍內(nèi),,以確保曲線的準(zhǔn)確性和可靠性,。 標(biāo)準(zhǔn)樣品個數(shù):標(biāo)準(zhǔn)樣品的個數(shù)至少應(yīng)有3個濃度,通常建議更多,,以提高擬合的準(zhǔn)確性和可靠性,。 重復(fù)性:每個標(biāo)準(zhǔn)點至少重復(fù)2次,這個重復(fù)是指從稀釋開始,,以確保數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性和重復(fù)性,。 三、標(biāo)準(zhǔn)曲線的核心問題 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或標(biāo)準(zhǔn)品:需要找到確切濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或標(biāo)準(zhǔn)品,。 基體匹配:標(biāo)準(zhǔn)系列和待測物質(zhì)一定要有相同和一致的基體,,以減少樣品基體對儀器響應(yīng)的干擾。 四,、標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗 標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗是實際操作中的難點,,主要包括以下方面:
精密度檢驗:考察試驗點在擬合直線方程左右的分布情況,需用F檢驗,,P<0.05作為線性檢驗合格的標(biāo)準(zhǔn),。 截距檢驗和斜率檢驗:分別考察Y=a+bX中a和b與0的統(tǒng)計學(xué)差異。a與0有差別說明有試劑空白或系統(tǒng)誤差,,而b若與0無差別說明儀器的靈敏度達(dá)不到分析要求,。 決定系數(shù):是相關(guān)系數(shù)的平方,提示回歸方程所解釋X對Y變化占Y變量的比值,。 失擬檢驗:看曲線擬合后剩下殘差與實驗數(shù)據(jù)本身隨機誤差(變異)之間的差別,,同樣采用F檢驗,此時失擬檢驗P應(yīng)>0.05,。 殘差的正態(tài)性檢驗:正態(tài)性才符合隨機誤差的特性,。 綜上所述,標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗應(yīng)該是線性檢驗結(jié)合失擬檢驗,,以及殘差的正態(tài)性檢驗結(jié)合,,才是統(tǒng)計學(xué)上比較完備的。
五,、標(biāo)準(zhǔn)曲線使用中的問題 是否需要人為增加(0,0)點:通常不能人為增加(0,0)點,,因為0管進入儀器可能也有響應(yīng)值,這也是考察試劑空白的一個重要步驟,。 是否需要減掉試劑空白:不需要,。儀器測出來標(biāo)準(zhǔn)系列的響應(yīng)值可以減掉試劑空白或減掉0管的響應(yīng)值來做,但在構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線時,,已經(jīng)認(rèn)為該響應(yīng)值就是0濃度,,即已經(jīng)扣除了空白,。 含量計算方法:在使用標(biāo)準(zhǔn)曲線查含量時,,可以先用樣品信號減空白信號,,然后去標(biāo)準(zhǔn)曲線推算含量。這樣出來的含量不確定度要小一些,。 總之,,標(biāo)準(zhǔn)曲線是分析檢測中的重要工具,其制作,、檢驗和使用都需要嚴(yán)格遵守相關(guān)要求和規(guī)范,,以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。 |