以下是一份詳細(xì)的紫外分光光度計(jì)使用指南:
### 一,、開機(jī)與預(yù)熱
1. **打開樣品室蓋**:檢查樣品室中是否放置有遮光物,若有則取出,。 2. **打開電源開關(guān)**:儀器進(jìn)入預(yù)熱狀態(tài),,預(yù)熱時(shí)間通常為20至30分鐘,具體根據(jù)儀器型號和說明書而定,。預(yù)熱是為了確保儀器穩(wěn)定,,提高測量準(zhǔn)確性。
### 二,、選擇光源與波長
1. **選擇光源**:對于紫外-可見分光光度計(jì),,若需要在紫外光區(qū)(200nm\~290nm)工作,,則需將光源切換至氘燈;若需要在紫外光區(qū)(290nm\~360nm)或可見光區(qū)工作,,則可能需要同時(shí)點(diǎn)亮氘燈和鎢燈(或僅點(diǎn)亮鎢燈),。 2. **選擇波長**:調(diào)節(jié)波長旋鈕或輸入實(shí)驗(yàn)所需的波長,選擇所需的單色光波長,。
### 三,、校準(zhǔn)與調(diào)零
1. **校準(zhǔn)**:目前型號較新的分光光度計(jì)具有開機(jī)自動(dòng)校準(zhǔn)功能。若無自動(dòng)校準(zhǔn)功能,,則需在使用前參照使用說明書進(jìn)行手動(dòng)校準(zhǔn),。 2. **調(diào)零**:在參比樣品池內(nèi)放入?yún)⒈葮悠罚ㄍǔ檎麴s水或空白溶液),進(jìn)行調(diào)零操作,,使吸光度讀數(shù)為0.000A,。若讀數(shù)不為0,,則需重復(fù)調(diào)零操作,,直至達(dá)到要求。
### 四,、測量與數(shù)據(jù)處理
1. **測量**:將待測樣品倒入比色皿中(液體在池中高度不低于一定標(biāo)準(zhǔn),,如3cm),放入樣品池內(nèi),,點(diǎn)擊測試按鈕進(jìn)行測量,。記錄測試數(shù)據(jù),包括波長,、透射比,、吸光度、測試時(shí)間等,。 2. **數(shù)據(jù)處理**:定量測試時(shí),,通常需要先測定若干個(gè)已知濃度的待測物標(biāo)準(zhǔn)樣品,根據(jù)其吸光值與濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。目前新型號的紫外分光光度計(jì)本身具有制作和計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的功能,,具體操作方式可參照設(shè)備使用說明。不具備標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制功能的設(shè)備,,可利用Excel軟件或坐標(biāo)紙輔助繪制,。
### 五、關(guān)機(jī)與保養(yǎng)
1. **取出吸收池**:測量完畢后,,取出吸收池,,清洗并晾干后入盒保存。 2. **關(guān)閉電源**:關(guān)閉電源,,拔下電源插頭,。 3. **放入干燥劑**:在樣品室內(nèi)放入干燥劑,,蓋上樣品室蓋,罩上防塵罩,。
### 六,、注意事項(xiàng)與常見問題處理
1. **比色皿的使用**:拿比色皿時(shí),手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,,不要碰比色皿的透光面,,以免沾污。清洗比色皿時(shí),,一般先用水沖洗,,再用蒸餾水洗凈。不能使用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿,,以免損壞,。 2. **防止光電管疲勞**:不測定時(shí)必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,,以延長光電管使用壽命,。 3. **讀數(shù)跳動(dòng)不穩(wěn)定**:可能由儀器受潮、電源線接地不良,、供電電源不穩(wěn)定,、高溫環(huán)境、儀器附近有陽光直射,、非預(yù)期的震動(dòng),、使用錯(cuò)誤的比色皿、樣品揮發(fā)性大,、光源燈老化,、前置放大板損壞、光路被非預(yù)期移動(dòng)等原因?qū)е?。?yīng)針對具體原因進(jìn)行處理,,如延長預(yù)熱時(shí)間、降低環(huán)境濕度,、使電源線安全接地,、使用交流穩(wěn)壓電源、改善環(huán)境以適應(yīng)儀器正常使用,、使用正確的比色皿,、使用比色皿蓋、更換光源燈,、修理或更換前置放大板,、重新調(diào)試光路等。
### 七,、軟件操作(針對配備軟件的紫外分光光度計(jì))
1. **打開軟件**:先打開電腦,,再打開紫外分光光度計(jì)電源,,點(diǎn)擊打開相應(yīng)的操作軟件。 2. **連接儀器**:點(diǎn)擊軟件中的連接按鈕,,等待系統(tǒng)自檢完畢,,確保自檢項(xiàng)目全部通過。 3. **選擇測定方式**:在軟件中選擇所需的測定方式,,如光度測定(定量)方式,、光譜測定方式等。 4. **設(shè)置參數(shù)**:根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置參數(shù),,如波長范圍,、掃描速度、采樣間隔等,。 5. **開始測定**:在參比光束和樣品光束下各放上空白試劑進(jìn)行基線校正后,,設(shè)置樣品并點(diǎn)擊開始鍵開始測定。 6. **保存與查看數(shù)據(jù)**:測定完畢后保存當(dāng)前測試數(shù)據(jù),,并可對已保存數(shù)據(jù)進(jìn)行查看和分析,。
請注意,不同型號的紫外分光光度計(jì)在操作上可能略有差異,,因此在使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀儀器說明書并遵循制造商的指示進(jìn)行操作,。 |
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