動物源食品中氯霉素檢測的固相萃取方法
（PolyClean X-HLB）

一、實驗?zāi)康?/span>

本法為以Polyclean X-HLB (60mg/3mL)柱開發(fā)的針對動物源食品(禽肉,、畜肉和水產(chǎn)品)中氯霉素樣本前處理凈化方法,，HPLC法作為檢測手段。Polyclean X-HLB (60mg/3mL)柱凈化效果良好,，回收率滿足測試要求,，重現(xiàn)性好,，與知名廠商同型號柱性能相當,。

二,、實驗?zāi)繕宋?br /> 氯霉素(CAS:56-75-7)

三、應(yīng)用范圍
本方法適用于動物源性食品(禽肉,、畜肉和水產(chǎn)品)中殘留藥物的檢測,。

四、參考標準
《農(nóng)業(yè)部1025號公告-21-2008動物源食品中氯霉素殘留檢測氣相色譜法》

五,、實驗材料
NuAnalyticalPolyCleanX-HLB固相萃取柱60mg/3mL,，W品牌HLB固相萃取柱60mg/3mL。

六,、實驗方法

1,、樣品待測溶液制備
取5±0.05g豬肉樣品，于50mL離心管中,，加入20    mL乙酸乙酯混合2min,，4000   r/min離心15 min，取上清液于另一離心管中,，再用20 mL乙酸乙酯重復(fù)提取殘渣1次,，合并兩次提取液，并加入500   μL氨水,，于45 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干,，加入500  μL甲醇混合1min，加入10 mL4%NaCl渦旋混勻10 s,，加入10 mL正己烷搖勻20次,，4000r/min離心5 min,，棄去上層,，再用10 mL正己烷脫脂一次，最后加入500 μL氨水混勻供上柱凈化用,。

2,、活化
依次用2 mL甲醇和2 mL水活化。

3,、上樣和洗脫

取上述備用液重力作用下過柱依次用2 mL水,、1 mL甲醇/乙腈/水/氨水(15:15:65:5, v/

v)淋洗上樣柱并抽干，最后用2 mL 5%氨化甲醇溶液洗脫柱子上的待測成分,。

4,、重新溶解
收集洗脫液，于45℃氮氣吹干,，準確加入1.0 mL甲醇/水(4:6,v/v)溶液溶解殘余物混勻,，0.22 μm濾膜過濾,，供HPLC測定。

5,、HPLC條件
色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6 mm,，5 μm)
檢測器：UV@278 nm
流動相：A:水           B:甲醇
洗脫方式：等度洗脫，A:B=60:40
柱溫：30℃    
流速：1.0mL/min           
進樣量：20μL

七,、實驗結(jié)果
1,、添加水平為0.5 mg/kg豬肉基質(zhì)中氯霉素(CAP)的添加回收結(jié)果

表1   添加水平為 0.5 mg/kg 豬肉基質(zhì)中氯霉素(CAP)的添加回收結(jié)果

名稱	回收率（%）			平均回收率（%）	RSD（%）
	1	2	3
氯霉素	92.6	89	87	89.5	3.2

    表 2    W 品牌同型號柱，添加水平為 0.5 mg/kg 豬肉基質(zhì)中氯霉素(CAP)的添加回收結(jié)果

名稱	回收率（%）			平均回收率（%）
	1	2
氯霉素	90.8	91.4		91.1