飲料中胭脂紅檢測的固相萃取方法

(Polyclean X- WAX)

一、實驗?zāi)康?/span>

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法,，HPLC 法作為分析方法,，檢測飲料中著色劑的含量。該方法可簡化樣品的前處理過程,，節(jié)省有機溶劑的使用,，操作簡便。

二,、實驗?zāi)繕?biāo)物

胭脂紅(CAS:569-64-2)。

三,、應(yīng)用范圍

本方法適用于飲料中合成著色劑的檢測的 HPLC 檢測及確證。

四,、參考標(biāo)準(zhǔn)

《GB/T 21916-2008 水果罐頭中合成著色劑的測定》,。

五,、實驗材料

Polyclean X-WAX 固相萃取柱 60mg/3mL(Cat.No. 9B-P005-03060),。

六、實驗方法1,、樣品提取

準(zhǔn)確稱取樣品 5.0 g 于 50 mL 離心管中,，超聲波振蕩提取 5 min， 渦旋 1 min,，4000

r/min 離心 5 min,，上清液轉(zhuǎn)移至 50 mL 離心管中,用水定容至 5 mL。

2,、SPE 柱活化

Polyclean X-WAX 固相萃取柱使用前用 2 mL 甲醇,、2mL 水活化 。3,、上樣和淋洗

在 Polyclean X-WAX 萃取柱上加入 5 mL 待凈化樣品,，收集流出液,，然后用 2 mL 水、

2 mL5%氨化甲醇淋洗,。

4,、洗脫

用 4 mL 37%鹽酸-乙醇（1:19,v/v）進行洗脫，控制流速 1 mL/min,，收集洗脫液,。

5、重新溶解

流出液 60 ℃減壓至干,，加 1 mL 水定容,，混勻，過 0.45 μm 濾膜,，待上機測試,。

5、HPLC 條件
設(shè)    備 ：Waters Alliance 2690
色譜柱 ：Neptune C18 (4.6×250 mm,5 μm)
檢測器 ：Waters 2487 紫外檢測器
流動相：A：甲醇         B：0.02 mol/L 乙酸銨緩沖溶液
洗脫方式：梯度洗脫

表 1 梯度洗脫條件

時間/min	A%	B%
--	5	95
10.00	20	80
18.00	60	40
25.00	60	40
25.10	5	95
40.00	5	95

流速：1.0 mL/min
檢測波長：509 nm
進樣體積:20 μL

七,、實驗結(jié)果

1,、5 mg/kg 飲料中胭脂紅的添加回收結(jié)果